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    實(shí)驗病理學(xué)技術(shù)—冰凍切片詳解剖析

    發(fā)布時間: 2021-12-08  點(diǎn)擊次數(shù): 4652次

    童鞋們,今天來和大家聊聊實(shí)驗病理學(xué)方面的技術(shù)——冰凍切片。

    冰凍切片因為不涉及乙醇脫水、二甲苯透明等有機(jī)溶劑處理步驟,能較好保存組織內(nèi)酶、糖及表面抗原的抗原性,是免疫組織化學(xué)和免疫熒光的常用切片方法。但是因為其切片厚度(8-10 µm)較石蠟切片(3-5 µm)厚,所以最后呈現(xiàn)的組織形態(tài)往往不如石蠟切片。

    一般的操作步驟是將新鮮組織取出后,盡快埋入已有OCT(冰凍切片專用膠)的冷凍包埋盒內(nèi)。然后放入液氮中速凍,之后移入-80攝氏度保存。如果需要馬上切片,需要在冰凍切片機(jī)中平衡溫度大概20-30分鐘,再在-20攝氏度下進(jìn)行冰凍切片。對于脂肪組織需要更低一些的溫度,一般在-25攝氏度左右切片。


    注意事項:

    1.組織埋入OCT中需要展平,且OCT中不能有氣泡;

    2.取材的組織不能帶有水分,否則容易形成冰晶,影響觀察;

    3.組織取材需迅速,驟冷速度快且均勻,但是驟冷時間不能過長,最好不要超過1分鐘。


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