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細(xì)胞中液泡系活體染色

發(fā)布時(shí)間： 2023-01-12　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1840次

簡介
細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)是利用中性紅（neutrol red）是液泡系的專一性活體染色劑的特性，在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí)，只將液泡系染成紅色，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色。
原理
細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)的基本原理是動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)由單層膜包裹的小泡都屬于液泡系，包括高爾基復(fù)合體、溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、轉(zhuǎn)運(yùn)泡、吞噬泡等。軟骨細(xì)胞內(nèi)含有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體，能合成與分泌軟骨黏蛋白及膠原纖維等，因而液泡系發(fā)達(dá)。中性紅（neutrol red）是液泡系的專一性活體染色劑，在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí)，只將液泡系染成紅色，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色。
材料與儀器
器材：
解剖器材、蠟盤、載玻片、蓋片、吸管、吸水濾紙、普通光學(xué)顯微鏡、蟾蜍。
試劑：

① 1/3000 中性紅;

② 0.65% Ringer 液（兩棲動(dòng)物用）（氯化鈉，0.65 g；氯-化-鉀，0.042 g；氯化鈣，0.025 g；蒸餾水，100 ml。）
步驟
細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)的基本過程可分為如下幾步：
A 取蟾蜍 1 只，搗毀脊髓法處死，將其腹面朝上固定于蠟盤上，剪開腹腔，取胸骨劍突軟骨最薄部分的一小片，置于載片上。
B 滴加 1/3000 中性紅，染色 15 min。
C 濾紙吸去染液。
D 滴加 0.65％ Ringer 液，蓋上蓋片，用濾紙從蓋片側(cè)面吸取多余液體。
E 鏡下觀察。
注意事項(xiàng)
1 為便于觀察，在取胸骨劍突時(shí)，盡量取較薄部位。
2 本實(shí)驗(yàn)因是活體染色，在實(shí)驗(yàn)的整個(gè)過程中，應(yīng)注意保持標(biāo)本的活體狀態(tài)，特別在取材時(shí)應(yīng)做到準(zhǔn)確、快速。

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