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    進(jìn)口胎牛血清實(shí)驗(yàn)時(shí)出現(xiàn)的黑點(diǎn)是怎么回事?

    發(fā)布時(shí)間: 2021-12-04  點(diǎn)擊次數(shù): 1412次
       進(jìn)口胎牛血清FBS是細(xì)胞培養(yǎng)中使用最多的生長(zhǎng)因子,因?yàn)樗懈咚降臓I(yíng)養(yǎng),用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)以生產(chǎn)抗體、抗原、干細(xì)胞和疫苗的含血清和血清減少培養(yǎng)基的配制。用于免疫測(cè)定和印跡的封閉劑,所有胎牛血清都是*可追溯的,并且來自經(jīng)過審核的供應(yīng)商。在單獨(dú)容器中處理FBS,并對(duì)其進(jìn)行三次0.1μ無菌過濾,消除了任何交叉污染的可能性。
      胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)過程中一旦發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)出現(xiàn),首先要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁;然后在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。
      如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么可能與以下幾種情況有關(guān):
      1.細(xì)胞生長(zhǎng)過老,破碎的細(xì)胞殘??;
      2.血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;
      3.配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長(zhǎng);
      4.配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
      5.培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
      胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)出現(xiàn):
      1.盡可能減少血清凍融次數(shù);
      2.培養(yǎng)基無需37℃水??;
      3.培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0-7.2;
      4.嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗;
      5.掌握細(xì)胞傳代的理想時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過老。
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